國衛院核心儀器設施中心

使用辦法

生物晶片服務使用辦法

一、

使用者

限本院院內及與本院有學術合作交流之產業或學術研究機構，需利用微陣列分析工具從事生物醫學相關研究者。

二、

使用申請教學影片

使用者請於線上系統填寫申請資料(參閱資料下載12)並將系統產生之申請單列印出來，由使用申請之研究室主持人簽名後，向本實驗室提出申請。使用相關費用由研究主持人計畫支付，優先順序原則以申請案提出之順序辦理。

院外合作之使用者第一次使用請先至"院外申請服務"網頁，建立自己的帳號資料才可進行線上預約動作。

生物晶片服務使用辦法 > 送件方式

晶片服務申請使用需於每月第三週前提出申請，並提供本室扣款相關資料，發票開立後請於3個月內匯款，並回報本單位，如超過期限匯款將列入本單位黑名單。每月第三周統一將晶片訂單送出，且於2 週後收到晶片與耗材。於確認扣款及耗材到達後便可開始進行實驗。如有報帳及扣款上之特殊需求，請事先通知。

申請案通過後，使用者會接獲通知請於通知之期限內將實驗檢體送達核心實驗室，收件後會再以E-Mail回覆收件時間及檢體狀態。

收件截止時間：週一至週五上午九點~下午五點。宅急便寄送者請於周四前寄送(重要!!寄送前先與實驗室人員確認)。

收件地點：

竹南院區:親自送達本院竹南院區研究大樓五樓 R2-5230 室。
其他院區:樣本包裹請填充2.5kg的乾冰並以低溫宅急便寄送至本院竹南院區。
地址：苗栗縣 350 竹南鎮科研路 35 號國家衛生研究院研究大樓五樓核心儀器設施中心R2-5230 室。

特別注意事項：

Gene expression 實驗

(1)	(1)	RNA 檢體之製備過程須防止 RNase 污染。RNA 檢體需溶於 RNase-free water，但不得含有 DEPC。
	(2)	建議以 Qiagen RNeasy 套組進行 RNA 分離純化；或以 TriZol 進行 RNA 分離，再以 Qiagen Rneasy 套組進行 RNA 分離及純化（見資料下載4），純化過程建議同時進行DNAse去除DNA的處理程序。
	(3)	Prokaryotic Total RNA 檢體處理方法請參考「資料下載4」。
	(4)	送件前建議先自行判斷樣品品質，如 OD260/OD280 ratio 需 >=1.9、 OD260/OD230 ratio 需 >=1.8、RNA 電泳圖 28S>18S（見資料下載4），送件後本室會再以 Bioanalyzer 2100 進行 QC，未過 QC 者通知使用者並退件並須收取 QC 費用。
	(5)	檢體應保存於 -80℃，並以乾冰運送至本室。

miRNA expression 實驗

(1)	(1)	勿用一般 RNA extraction Kit 抽取 RNA，以免造成 small RNA 流失。
	(2)	miRNA extraction 流程及建議試劑請參考「資料下載5」。

Cytogenesis 實驗

(1)	(1)	需確認 DNA 無任何汙染，no heme（from blood）、chelating agents（EDTA）。
	(2)	OD260/OD280 ratio 需介於 1.8~2.0，OD260/OD230 ratio 需大於 1.5。
	(3)	以 1% agarose gel check，大約 90% 的 DNA 需大於 10KB 以上。
	(4)	DNA sample 注意事項請參考「資料下載六」。

檢體種類與所需量：

RNA QC 服務

RNA 檢體請將濃度調整至 500ng/μl ~25ng/μl，體積為 5μl 以上並以 0.2ml PCR tube 分裝。

Gene expression 晶片服務

RNA 檢體請將濃度調整至 300ng/μl~100 ng/μl，體積為 10~5μl（建議值10μl）。

miRNA expression 晶片服務

Sample 純化，請參考「資料下載5」。

Total RNA: 建議為 1 μg，濃度為 125 ng/μl以上，體積為 15μl。

Enriched LMW RNA, not quantitated: Enriched from 130ng -1000ng total RNA。

PS：建議同一批實驗固定同一濃度 total RNA 進行 Enriched，相關 protocol 請參考「資料下載5」。

Cytogenesis 晶片服務

Human genomic DNA：濃度請調整至 50 ng/μl 以上，total 體積為 20μl in 1X TE buffer。

公告日:2015/09/02